Estudo para o desenvolvimento de métodos para quantificação de Phl p5 em amostras de ar atmosférico colhidas na cidade de Évora

Abstract

O Phl p 5 é um alergeno major do grupo V dominante no pólen da espécie Phleum pratense, que contribuí para o agravamento das doenças alérgico-respiratórias durante a estação polínica. Porém, não estão estabelecidos métodos para que permitam quantificar os aeroalergenos. O objectivo deste trabalho foi desenvolver e implementar metodologias para quantificar o Phl p 5 em amostras de ar exterior captado em Évora. Os pólenes e o alergeno foram colhidos utilizando colectores do tipo Hirst, e de impacto (Chemvol), respectivamente. A quantificação do alergeno efectuou-se por ELISA. Dos tampões de extracção testados, o tampão HCO3NH4 contendo BSA foi o mais adequado para extrair o aeroalergeno. Estabeleceu-se um método fiável para determinação de Phl p 5. Em 2009, o perfil de distribuição temporal do aeroalergeno acompanhou o perfil de distribuição polínico de gramíneas, registando-se uma correlação entre os conteúdos em alergeno e pólen, indicando que o alergeno é transportado pelos grãos de pólen; ABSTRACT: The Phl p 5 is a major allergen of group V and dominant in pollen of Phleum pratense and so it aggravates allergic and respiratory diseases resulting from pollen exposure. Presently, there are no feasible methodologies to determine Phl p 5 aeroallergen in outdoor air samples. Pollen particles were collected through a Hirst-type volumetric air sampler and the aeroallergens were collected using an impact collector Chemvol. After extraction, the quantification of Phl p 5 was performed using an ELISA method. Several buffer systems were tested for extraction of the allergen content and HCO3NH4 buffer with BSA was the best for the quantification of Phl p 5. Firstly, a feasible method for Phl p 5 determinations in air samples was established. In 2009 pollen season, the allergen profile followed the pollen profile and a positive correlation between the air content of the two parameters was found, suggesting that Phl p 5 is associated to the pollen grains.