Vírus na oliveira: qPCR, uma nova ferramenta para a sua deteção

Abstract

A deteção dos vírus com maior expressão nos olivais é atualmente de extrema importância face ao caracter não tratável destes agentes patogénicos, à sua facilidade de disseminação e à sua implicação na qualidade do azeite. Tradicionalmente, a metodologia aplicada para este fim baseia-se na técnica de ‘end-point’ PCR utilizando ‘primers’ para a deteção simultânea de diferentes vírus (‘multiplex RT-PCR’). Todavia, a técnica de PCR em tempo real (qPCR) é comparativamente bastante mais sensível e específica nos casos em que o agente patogénico existe em baixo título e está irregularmente distribuído nas plantas, como é o caso dos vírus da oliveira. O trabalho aqui apresentado descreve o estabelecimento de um protocolo eficiente, baseado na técnica de qPCR para a deteção dos principais vírus da oliveira, com desenho de sondas e ‘primers’ específicos para cada um dos vírus. Os resultados serão comparados com resultados de PCR convencional. A técnica qPCR é desta forma proposta como uma ferramenta promissora para o diagnóstico de vírus na oliveira que poderá ser aplicada na avaliação de árvores de campo.