Contribuição para o estudo da caracterização molecular de isolados de Erysiphe necator nas vinhas do Alentejo

Abstract

Este trabalho é o primeiro a ser realizado em Portugal, no sentido de optimizar técnicas de caracterização molecular de isolados do fungo Erysiphe necator e no sentido abordar a evolução deste fungo numa das mais importantes regiões vitivinícolas do nosso País, o Alentejo. Utilizaram-se 60 amostras de videiras infectadas com E. necator, provenientes de videiras de diferentes castas representativas do Alentejo. A amplificação por PCR do fragmento de 450 pb do gene da P-tubulina foi conseguido em 11 amostras, tendo estas sido posteriormente sujeitas a análise CAPS para identificação dos grupos genéticos A e B. Destas 11 amostras, obtiveram-se 5 do grupo genético B, sendo 2 delas obtidas de 'drapeaux', e em 4 dessas amostras aparentam coexistir também isolados do grupo genético A. Na análise por NAS-PCR, obteve-se um fragmento de 1756 pb que contém o gene CYP51 em 9 amostras, mostrando 1 isolado sensível e 8 resistentes aos fungicidas DMI's. Apesar do baixo número de resultados obtidos, o facto da maioria dos isolados ser resistente aos DMI's pode ser um dado indicativo para a gestão dos tratamentos contra o oídio. - ABSTRACT: This work is the first one reported in Portugal, in the matter of optimization of molecular characterization techniques of Erysiphe necator isolates and in the approaching the evolution of this fungus in one of the most important wine region of our country, Alentejo. We analyzed 60 E. necator infected samples collected from different grapevines in the Alentejo region. The PCR amplification of a 450 bp fragment from -tubuline gene was obtained only in 11 of these samples, that were then subjected to CAPS analysis for identification of the different genetic groups, A and B. From those 11 samples, 5 belonged to B group, and 2 of those samples were obtained from 'flag shots'. Four of these 5 samples seem to have simultaneously isolates from the two genetic groups. The amplification of the 1756 bp fragment that contain the CYP51 gene was obtained only in 9 samples, but the NAS-PCR analysis was applied to all60 samples. The obtained results show 1 sensitive isolate and 8 resistant isolates to DMI's fungicides. Although the low amount of results obtained, the majority are DMI's resistant, which indicate that attention is required in powdery mildew management.