Extração De Alergénios Do Pólen De Oliveira: Avaliação da Eficiência de Diferentes Soluções Tampão

Abstract

O pólen de oliveira (Olea europaea) é uma das principais causas de alergia sazonal do tipo 1 que afeta mais de 20% da população na região Mediterrânica, sendo o Ole e 1 um alergénio major. Contudo, os métodos estabelecidos para a sua extração e quantificação são muito morosos e, devido ao tipo de soluções usadas para a extração, não permitem a aplicação de alguns métodos de estudo de proteínas que permitiriam a sua melhor caracterização.Avaliar a eficiência de extração de diferentes soluções tampão que contribuam a determinação mais fácil e célere de Ole e 1 em amostras de ar atmosférico colhidas na cidade de Évora. As amostras dos bioaerossóis contendo o alergénio foram recolhidas utilizando um coletor “ChemVol – High Volume Cascade Impactor” colocado na plataforma meteorológica do Centro de Geofísica da Universidade de Évora, durante o ano de 2010. A fração proteica foi extraída utilizando soluções tampão diferentes: bicarbonato de amónio, pH 8, ou Fosfatos, pH 7,5 e pH 8,12, suplementados com BSA 0,1% ou Triton X-100 0,05%. A quantificação de Ole e 1 foi feita por uma técnica ELISA específica [1] e a quantificação da proteína total pelo método de Bradford [2].A utilização de soluções tampão de fosfatos constitui uma mais-valia para a quantificação e caracterização dos alergénios do pólen de Oliveira. Esta permite: Tornar o processo de quantificação de Ole e 1 mais rápido e simples, eliminando o passo de liofilização, pois as soluções de fosfatos são adequadas à aplicação direta em ELISA; A aplicação de outros métodos de caracterização de proteínas a estes extratos, uma vez que dispensa a utilização de BSA.

Este trabalho poderá contribuir para uma futura automatização do processo de determinação de alergénios do pólen em amostras de bioaerossóis.